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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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木黴屬通用PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Trichoderma spp.PCR |
YS-P014858 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本(běn)建議復核一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
木黴屬(shǔ)通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一般用電(diàn)泳分析，不一定要用同(tóng)位素，無放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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