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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨號 |
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丙型脊髓(suǐ)灰(huī)質(zhì)炎病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P014957 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴增期，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的特異性與保守性。
丙型(xíng)脊髓(suǐ)灰(huī)質炎病(bìng)毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引物與模板的(dí)正確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大大增加，被擴增的靶基因(yīn)片段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高的靶基因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指數方式增加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地將反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析，不(bù)一(yī)定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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