產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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伯(bó)氏疏(shū)螺旋(xuán)體PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P014958 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
伯氏(shì)疏螺旋體PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中引物(wù)與模板的(dí)正確結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一個靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不需要(yào)分離病毒或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
