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產品中心
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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綠膿杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015120 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙染會出現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或試劑(jì)配製不(bù)準確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保守性。
綠膿(nóng)杆菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及引物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指數方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一(yī)定要(yào)用同位素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求低
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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