產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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綠豆(dòu)內源基因PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015119 |
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣本；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
綠豆內(nèi)源基因PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很高的正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用同位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板。可直接用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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