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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
| 產品名稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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牛呼吸道(dào)合(hé)胞病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015157 |
儲存條件:-20℃避光保存,避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫,避光。
有效期(qī):一年
貨期:現貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià),產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有明顯的指數擴增期,Ct值(zhí)應小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú),否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本;對於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次,若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期,則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果;
2. 試劑運輸(shū),保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。

②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
牛(niú)呼(hū)吸(xī)道合(hé)胞病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模板的正確結合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行,結合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因(yīn)區,其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞;在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位);在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後,即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng),一般在(zài)2~4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求低
不需要分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液,體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發,細(xì)胞,活(huó)PCR技術(shù)概論。
