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PCR檢測試劑盒
人E-選擇素(sù)GT基(jī)因多(duō)態(tài)性(xìng)檢測試劑盒(PCR-RLFP)
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2024-3-19 瀏覽(lǎn)次(cì)數(shù)：677
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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人(rén)E-選(xuǎn)擇(zé)素(sù)GT基因(yīn)多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP) |
50T |
YS-P015192 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控品擴增曲綫的(dí)最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性。
人E-選(xuǎn)擇(zé)素(sù)GT基(jī)因(yīn)多態性檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(PCR-RLFP)其中引物(wù)與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度(dù)下進(jìn)行，結合的特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是以指數(shù)方式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析，不一定要用同位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分離病毒(dú)或細菌及培養細胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
