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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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人(rén)乳頭(tóu)瘤病毒(dú)型PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015216 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年，這是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中同時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降，可能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
人乳頭(tóu)瘤病(bìng)毒型PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可以在較(jiào)高的溫度(dù)下進行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高的正確(què)度。再通過(guò)選擇特異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數方(fāng)式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低
不需要分離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
