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產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
|
中華鱘特定基(jī)因(yīn)序列PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015330 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能(néng)會導致出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
中華鱘特定(dìng)基(jī)因(yīn)序(xù)列PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生成量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
- 上一條(tiáo)：豬(zhū)牛羊布魯氏菌病(bìng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒
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