產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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豬(zhū)丹毒杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015334 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增部分(fēn)的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽(yáng)性，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可(kě)疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製不(bù)準確引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
豬(zhū)丹毒杆菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使反應中模(mó)板與引物的結(jié)合(hé)(復性)可以在較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為擴增模板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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