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核(hé)酸檢測試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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禽流(liú)感病(bìng)毒(dú)HN（AIV-HN）核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015636 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
禽(qín)流感病毒HN（AIV-HN）核酸檢測(cè)試劑盒其中引物與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區，其特(tè)異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不(bù)一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
