差(chà)異脲(niào)原體PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)使(shǐ)用方法:

　　注:所(suǒ)有試劑(jì)使用前(qián)需(xū)完(wán)全(quán)解(jiě)凍(dòng),混合均匀(yún),6,000rpm離心(xīn)數(shù)秒(miǎo)後使(shǐ)用(yòng)。

　　1. 樣本(běn)處理(lǐ)(樣本處(chǔ)理區(qū))

　　待檢(jiǎn)樣(yàng)本的核酸(suān)提(tí)取可(kě)采(cǎi)用病毒(dú)RNA提取試(shì)劑盒(hé)或自動化核酸(suān)提取儀等(děng),具體(tǐ)提(tí)取方(fāng)法請參照相(xiāng)關說明書。陽性(xìng)質控品(pǐn)及陰性質(zhì)控品無(wú)需提(tí)取,可直接使用(yòng)。

　　2. 擴(kuò)增試劑準備(bèi)(PCR前(qián)準備區(qū))

　　取N個(gè)(N=陰性質控品+待檢樣(yàng)本(běn)+陽性質控品(pǐn))PCR反應管,每(měi)管分別加(jiā)入FMD RT-PCR反(fǎn)應液19μl，RT-PCR酶(méi)1 μl (也(yě)可根據(jù)每(měi)頭(tóu)份用量(liáng)計算N+1份FMD RT-PCR反應液，RT-PCR酶所需總(zǒng)量,兩者混(hùn)匀離心(xīn)後分(fēn)裝20 μl至(zhì)單個(gè)PCR反(fǎn)應管(guǎn))。

　　組(zǔ)分每(měi)頭份用量(liáng)FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

　　1 .將所有PCR反應管於(yú)6,000rpm離(lí)心30s,轉移至樣本(běn)處理區(qū)。

　　2.加樣(樣本(běn)處理區)

　　3.在上(shàng)述的(dí)PCR反應(yīng)管(guǎn)中分(fēn)別加入待(dài)檢(jiǎn)樣本RNA提(tí)取物(wù)，陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,於6,000rpm離(lí)心10s,轉(zhuǎn)移(yí)至擴(kuò)增區。

　　樣本(běn)采(cǎi)集，存(cún)放(fàng)及運輸:

　　1，樣本(běn)采集:各(gè)類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法(fǎ)采集。

　　2，存放(fàng):樣本在2~8℃條件下保存(cún)應(yīng)不超(chāo)過(guò)72h,-70℃以下可(kě)長期保(bǎo)存,但應(yīng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(zui多凍(dòng)融3次(cì))。

　　3，運輸(shū):采用(yòng)泡(pào)沫(mò)箱加(jiā)冰(bīng)密封(fēng)進行運(yùn)輸(shū)。