測定(dìng)意義
NADK（EC 2.7.1.23）廣泛(fàn)存在於動(dòng)物，植(zhí)物，微(wēi)生(shēng)物和培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)中，是目前所(suǒ)發現(xiàn)的生(shēng)物(wù)體內惟(wéi)一(yī)能(néng)夠(gòu)催化(huà)NAD+磷(lín)酸化生(shēng)成NADP+的酶(méi)，可(kě)催化NAD(H)以(yǐ)ATP或(huò)無機多聚(jù)磷(lín)酸(suān)[poly(P)]作為(wéi)磷酰基(jī)供體進(jìn)行磷(lín)酸(suān)化反應(yīng)，生成NADP(H)。因此，NAD激(jī)酶在(zài)合(hé)成NADP(H)以(yǐ)及(jí)調(tiáo)節NAD(H)與NADP(H)的(dí)平衡上具有重要作用。
測定(dìng)原理(lǐ)
NADK催(cuī)化NAD+磷酸(suān)化，生成(chéng)NADP+；NADP+可(kě)被6-磷酸葡萄糖(táng)脫氫酶還(huán)原為NADPH；NADPH通過(guò)PMS的遞(dì)氫作用，還(huán)原氧化型噻(sāi)唑(zuò)藍（MTT），通過在600 nm下(xià)測(cè)定MTT的還原速度（吸(xī)光值(zhí)的(dí)變化(huà)）可(kě)反映(yìng)出(chū)NADK活(huó)性(xìng)的大小。
需自備的儀(yí)器(qì)和(hé)用品(pǐn)
可見分光光度計/酶標儀，恒溫(wēn)水(shuǐ)浴鍋(guō)，台式(shì)離心機，可(kě)調式(shì)移(yí)液器，微量石英比(bǐ)色(sè)皿/96孔板和蒸餾水。