測(cè)定意義
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存(cún)在(zài)於(yú)動(dòng)物，植物，微(wēi)生物(wù)和(hé)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)中，綫粒(lì)體(tǐ)中(zhōng)MDH是TCA循環(huán)的關鍵酶(méi)之(zhī)一，催化蘋果(guǒ)酸(suān)形成草酰乙酸；相(xiāng)反(fǎn)，胞漿中MDH催化草(cǎo)酰乙酸(suān)形(xíng)成(chéng)蘋果(guǒ)酸。草酰乙(yǐ)酸是重要的中間產物， 連接(jiē)多條(tiáo)重(zhòng)要(yào)的代(dài)謝途徑。因此，MDH在(zài)細胞(bāo)多種生(shēng)理活動中扮(bàn)演著(zhuó)重要的(dí)角(jiǎo)色(sè)，包括綫粒體(tǐ)的(dí)能(néng)量(liáng)代謝， 蘋果酸(suān)-天(tiān)冬(dōng)氨酸穿梭(suō)係(xì)統，活性(xìng)氧(yǎng)代(dài)謝(xiè)和抗病(bìng)性等(děng)。根據(jù)不同(tóng)的(dí)輔酶特異性，MDH分(fēn)為(wéi)NAD-依(yī)賴的(dí)MDH和NADP-依賴的MDH，細(xì)菌中通(tōng)常隻含有NAD-MDH，在真核細胞中，NAD-MDH分(fēn)布於細胞(bāo)質(zhì)和綫粒(lì)體中。
測定(dìng)原(yuán)理(lǐ)
NAD-MDH催(cuī)化NADH還(huán)原(yuán)草酰(xiān)乙酸生成蘋果(guǒ)酸(suān)，導致340nm處光吸收下降(jiàng)。
需自(zì)備(bèi)的儀器和(hé)用品(pǐn)
紫外分光光(guāng)度計/酶標儀(yí)，台式(shì)離(lí)心機(jī)，水浴鍋(guō)，可調式移液(yè)器(qì)，微量石(shí)英(yīng)比色皿/96孔板(bǎn)和(hé)蒸(zhēng)餾(liù)水(shuǐ)。格