大(dà)鼠(shǔ)腸平(píng)滑(huá)肌細(xì)胞(bāo)

大鼠(shǔ)腸平滑肌細(xì)胞(bāo)分離(lí)自腸組(zǔ)織；不(bù)區(qū)分大(dà)腸(cháng)，小(xiǎo)腸等(děng)；小(xiǎo)腸(cháng)位於腹中，上端接幽門與胃相通(tōng)，下(xià)端通(tōng)過(guò)闌(lán)門(mén)與(yǔ)大腸(cháng)相連(lián)，是食物消化吸收的主(zhǔ)要場(cháng)所(suǒ)。小(xiǎo)腸盤(pán)曲(qū)於腹(fù)腔內，上連(lián)胃幽門(mén)，下接盲腸，分(fēn)為(wéi)十二指(zhǐ)腸(cháng)，空腸(cháng)和(hé)回腸三部(bù)分(fēn)。小(xiǎo)腸(cháng)內(nèi)消(xiāo)化(huà)是(shì)至關重要(yào)的，因(yīn)為食(shí)物(wù)經(jīng)過小腸(cháng)內(nèi)胰(yí)液(yè)，膽汁(zhī)和小(xiǎo)腸液(yè)的化學(xué)性消化及小腸運動的(dí)機械(xiè)性消化後(hòu)，基本上(shàng)完成了消(xiāo)化(huà)過程(chéng)，同時(shí)營(yíng)養物質(zhì)被小腸粘膜吸(xī)收了(liǎo)。小腸管壁(bì)由(yóu)粘(nián)膜(mó)，粘膜(mó)下層，肌層(céng)和漿膜(mó)構(gòu)成。其(qí)結(jié)構特(tè)點是(shì)管壁(bì)有(yǒu)環(huán)形皺襞，粘(nián)膜有許(xǔ)多(duō)絨(róng)毛(máo)，絨(róng)毛根(gēn)部(bù)的(dí)上(shàng)皮下(xià)陷至固(gù)有層(céng)，形成管狀的腸腺(xiàn)，其(qí)開口(kǒu)位於絨毛根(gēn)部之間。絨(róng)毛(máo)和(hé)腸腺(xiàn)與小腸的消化(huà)和(hé)吸收功(gōng)能(néng)關係(xì)密切(qiē)；構成腸腺(xiàn)的細胞(bāo)有柱狀細(xì)胞，杯狀(zhuàng)細胞(bāo)，潘(pān)氏細胞和未(wèi)分(fēn)化細(xì)胞。柱狀細胞和內分泌(mì)細(xì)胞(bāo)與(yǔ)絨(róng)毛上皮相似，接近絨(róng)毛的柱狀(zhuàng)細胞與(yǔ)吸收細(xì)胞相似(sì)，絨(róng)毛(máo)深(shēn)部(bù)的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短(duǎn)，不形(xíng)成紋(wén)狀(zhuàng)緣。小(xiǎo)腸(cháng)有(yǒu)三(sān)種功能即消(xiāo)化(huà)，吸收和(hé)分泌(mì)及(jí)運動功能(néng)，其中(zhōng)以(yǐ)吸(xī)收和分泌(mì)功能為(wéi)主(zhǔ)。平滑(huá)肌細胞(bāo)的收縮是負(fù)責腸蠕動(dòng)的動力(lì)，促使(shǐ)食(shí)物向(xiàng)下運(yùn)動(dòng)。小腸平(píng)滑(huá)肌(jī)細胞(bāo)原代(dài)分離(lí)培(péi)養3天後(hòu)，可(kě)見細胞貼壁伸展，細胞(bāo)形態大小不一，呈梭形(xíng)，不(bù)規則形，三(sān)角(jiǎo)形或扇(shàn)形，核卵圓形，居(jū)中；2周後(hòu)細胞(bāo)匯合，多(duō)數細(xì)胞伸(shēn)展呈長(cháng)梭形，胞漿豐富，有(yǒu)分(fēn)枝狀突(tū)起，細(xì)胞平行(háng)排列(liè)成單(dān)層或部分區域(yù)多層(céng)重(zhòng)疊(dié)生(shēng)長，高低起(qǐ)伏；細胞(bāo)密度低時，常交織成網(wǎng)狀(zhuàng)；密(mì)度高(gāo)時，則(zé)排列(liè)為旋渦狀(zhuàng)或柵(zhà)欄(lán)狀。傳代後細胞(bāo)生長較(jiào)快(kuài)，4-6天(tiān)即可匯(huì)合，並保(bǎo)持上述(shù)形態學特(tè)征和生(shēng)長(cháng)特點。小(xiǎo)腸平滑(huá)肌肉(ròu)瘤是起(qǐ)源於小腸壁(bì)肌(jī)層(céng)，黏(nián)膜(mó)下肌(jī)層(céng)和腸壁血(xiě)管平滑(huá)肌的惡(è)性腫瘤(liú)，是小腸結締組織惡性腫瘤(liú)中(zhōng)最(zuì)常見(jiàn)的一種。因(yīn)此(cǐ)，體外小腸平(píng)滑(huá)肌細胞的(dí)培(péi)養(yǎng)對(duì)研究(jiū)小(xiǎo)腸平(píng)滑(huá)肌肉瘤提供了基礎(chǔ)和前(qián)提。此外，體外(wài)培(péi)養(yǎng)細胞，由(yóu)於(yú)影(yǐng)響因(yīn)素較(jiào)為單(dān)一，是研(yán)究細(xì)胞功能以及相應的(dí)細(xì)胞(bāo)信號(hào)轉導機製的基礎。

自備試(shì)劑(jì)： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶  ，PBS  ，完全(quán)培(péi)養基

培養基： 大鼠腸平滑肌(jī)細(xì)胞完全培養基(jī)(含FBS，生(shēng)長添(tiān)加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液頻(pín)率(shuài)： 每2-3天換液(yè)一次(cì)

生長特性： 貼壁(bì)

細胞(bāo)形(xíng)態(tài)： 成(chéng)纖維(wéi)細胞樣(yàng)

傳代(dài)比(bǐ)例： 1:2

傳代特(tè)性： 可傳(chuán)5代(dài)左右；3代(dài)以內狀態最(zuì)佳

消化(huà)液： 0.25%胰蛋白酶

大(dà)鼠腸平滑(huá)肌(jī)細胞(bāo)體外培養(yǎng)周(zhōu)期(qī)有限；建議使(shǐ)用配(pèi)套的專(zhuān)用(yòng)生長(cháng)培(péi)養基及正(zhèng)確(què)的操作(zuò)方法(fǎ)來(lái)培(péi)養，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀(zhuàng)態。

方法(fǎ)簡介 實驗室分(fēn)離(lí)的(dí)大(dà)鼠腸(cháng)平(píng)滑(huá)肌細(xì)胞采用膠原酶(méi)消(xiāo)化(huà)法(fǎ)結合差(chà)速貼壁法製(zhì)備(bèi)而(ér)來(lái)，細(xì)胞(bāo)總(zǒng)量(liáng)約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測(cè) 實驗(yàn)室分(fēn)離的(dí)大鼠腸(cháng)平滑(huá)肌細胞(bāo)經(jīng)α-SMA免疫熒(yíng)光(guāng)鑒定(dìng)，純(chún)度(dù)可(kě)達(dá)90%以上，且不(bù)含有HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原(yuán)體，細(xì)菌(jūn)，酵(jiào)母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌(jūn)等(děng)。