大鼠(shǔ)骨(gǔ)髓(suǐ)間(jiān)充質幹細胞

大鼠骨髓(suǐ)間(jiān)充質(zhì)幹細(xì)胞（BMSC）分離(lí)自骨髓(suǐ)；骨(gǔ)髓是(shì)機(jī)體(tǐ)的造血(xiě)組(zǔ)織，位(wèi)於(yú)身體的(dí)許(xǔ)多(duō)骨骼內。成年動物(wù)的(dí)骨(gǔ)髓分兩種(zhǒng)紅骨(gǔ)髓和黃骨(gǔ)髓(suǐ)。紅(hóng)骨髓能(néng)製(zhì)造紅細胞，血(xiě)小板和(hé)各種白細胞。血小(xiǎo)板有止血(xiě)作(zuò)用(yòng)，白細胞(bāo)能殺滅與抑製各種(zhǒng)病原體，包(bāo)括細菌(jūn)，病毒(dú)等(děng)；某(mǒu)些(xiē)淋巴細胞能製(zhì)造(zào)抗(kàng)體。因(yīn)此(cǐ)，骨髓不但是造(zào)血(xiě)器官(guān)，它還是(shì)重(zhòng)要的免(miǎn)疫(yì)器(qì)官。骨(gǔ)髓是存在於長骨（如肱骨，股骨(gǔ)）的骨髓(suǐ)腔(qiāng)和扁平骨（如(rú)髂骨）的稀鬆骨(gǔ)質(zhì)間的網眼(yǎn)中，是一種(zhǒng)海(hǎi)綿(mián)狀的組織，能產生血細胞的骨髓(suǐ)略呈(chéng)紅(hóng)色，稱為紅(hóng)骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全(quán)身骨髓(suǐ)腔，隨著年齡增(zēng)大(dà)，脂肪(fáng)細(xì)胞(bāo)增多，相當部(bù)分紅骨髓被黃骨髓(suǐ)取代(dài)，最(zuì)後(hòu)幾(jī)乎隻(zhī)有(yǒu)扁平(píng)骨骨(gǔ)髓腔中有(yǒu)紅(hóng)骨(gǔ)髓。骨髓基質(zhì)係統內存在的骨(gǔ)髓間充(chōng)質幹(gān)細胞是(shì)一種除造血(xiě)幹細(xì)胞以(yǐ)外的(dí)，具(jù)有高(gāo)度自(zì)我更(gēng)新(xīn)能力和多向(xiàng)分化潛能(néng)的(dí)幹細(xì)胞，可以(yǐ)向(xiàng)骨(gǔ)，軟(ruǎn)骨，肌組(zǔ)織，皮膚，脂肪(fáng)，神經等多種(zhǒng)組織分化(huà)，因此可(kě)以作為組織工(gōng)程中的(dí)種子細胞。在(zài)骨(gǔ)髓中，BMSC占(zhān)骨髓有(yǒu)核(hé)細(xì)胞(bāo)總數的0.001%-0.1%，含量極低(dī)。骨髓(suǐ)間充(chōng)質幹(gān)細(xì)胞的體(tǐ)外(wài)培(péi)養條(tiáo)件(jiàn)要(yào)求(qiú)較(jiào)高(gāo)，在培養過程中，受貼壁時間，種植密度(dù)，血清(qīng)含量(liáng)，培養(yǎng)溫度(dù)和(hé)培(péi)養基(jī)pH值(zhí)等條(tiáo)件的影響。

自備(bèi)試劑
： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶  ，PBS  ，完全(quán)培養基

培(péi)養(yǎng)基
： 大鼠(shǔ)骨髓間充(chōng)質幹(gān)細(xì)胞(bāo)完(wán)全培養基(含(hán)FBS，生(shēng)長添加(jiā)劑，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液(yè)頻(pín)率
： 每(měi)2-3天換液(yè)一次(cì)

生(shēng)長(cháng)特(tè)性(xìng)
： 貼(tiē)壁生長

細(xì)胞(bāo)形態
： 成纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)樣

傳代比(bǐ)例
： 1:2

傳代特性(xìng)
： 可傳(chuán)5代(dài)左右；3代以內狀(zhuàng)態最佳

消化液
： 0.25%胰(yí)蛋白酶(méi)

大鼠骨髓(suǐ)間(jiān)充質幹(gān)細胞體(tǐ)外培(péi)養周(zhōu)期有限；建(jiàn)議使(shǐ)用(yòng)配套的專用(yòng)生長(cháng)培養(yǎng)基及正確(què)的操(cāo)作(zuò)方法(fǎ)來培(péi)養(yǎng)，以此保證該(gāi)細胞(bāo)的最佳(jiā)培養狀態。

方法(fǎ)簡介 實驗(yàn)室分離(lí)的大鼠(shǔ)骨髓(suǐ)間充質幹(gān)細胞(bāo)采用(yòng)衝洗骨髓(suǐ)，密度(dù)梯度離心(xīn)，差速貼壁(bì)法結合培養基篩選(xuǎn)製備(bèi)而來，細胞(bāo)總量(liáng)約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質量檢測 實驗(yàn)室分(fēn)離的大鼠骨髓間充質幹細(xì)胞(bāo)經CD90或CD44免疫熒(yíng)光(guāng)鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細菌，酵(jiào)母(mǔ)和真(zhēn)菌(jūn)等。