大鼠骺(hóu)軟(ruǎn)骨細胞(bāo)

大(dà)鼠(shǔ)骺軟骨(gǔ)細胞分(fēn)離(lí)自骨(gǔ)骺(hóu)生長(cháng)板
；骨骺生(shēng)長板(bǎn)位於(yú)長骨兩(liǎng)端骨骺(hóu)和骨(gǔ)幹之間(jiān)的軟(ruǎn)骨組(zǔ)織，其(qí)中的骺軟骨細(xì)胞(bāo)可分裂，成熟，肥大，最終(zhōng)被骨組織(zhī)所替(tì)換，對於(yú)長骨(gǔ)生(shēng)長具有重要作(zuò)用(yòng)。幼稚的骺(hóu)軟(ruǎn)骨細(xì)胞位(wèi)於(yú)軟骨組(zǔ)織(zhī)的表(biǎo)層(céng)，單個分(fēn)布，體(tǐ)積較小，呈橢(tuǒ)圓形，長(cháng)軸(zhóu)與軟骨表麵(miàn)平(píng)行，越向(xiàng)深層的骺軟骨(gǔ)細胞(bāo)體積之(zhī)間增(zēng)大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵(luǎn)圓形(xíng)，染色(sè)淺(qiǎn)，細(xì)胞質(zhì)弱嗜鹼性，常見(jiàn)數量不一的(dí)脂(zhī)滴。成熟的(dí)骺(hóu)軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成(chéng)群分布於(yú)軟骨(gǔ)陷窩(wō)內，這些(xiē)骺(hóu)軟(ruǎn)骨細(xì)胞由(yóu)同一個母細胞(bāo)分裂增(zēng)殖而成(chéng)，稱(chēng)為(wéi)同(tóng)源細胞群。電鏡下(xià)，骺軟(ruǎn)骨細(xì)胞有突(tū)起和皺褶，細(xì)胞質內有(yǒu)大(dà)量(liáng)的粗麵(miàn)內(nèi)質網和發達的(dí)高爾(ěr)基復(fù)合(hé)體(tǐ)及(jí)少(shǎo)量的綫(xiàn)粒體。在組織切片(piàn)中，骺(hóu)軟(ruǎn)骨細(xì)胞收縮為(wéi)不(bù)規則(zé)形，在軟骨囊(náng)和(hé)細胞(bāo)之間出現較(jiào)大(dà)的腔(qiāng)隙(xì)。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對於研(yán)究其生(shēng)理(lǐ)功(gōng)能，藥物(wù)作用以及(jí)各種(zhǒng)致(zhì)病因(yīn)素(sù)作用下(xià)的病(bìng)理生理(lǐ)改(gǎi)變(biàn)具重要意義。

自備試(shì)劑： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶  ，PBS  ，完(wán)全培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 大鼠骺軟骨(gǔ)細胞完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(含FBS，生長添加(jiā)劑，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液(yè)頻(pín)率： 每3-4天換液一次

生(shēng)長(cháng)特(tè)性： 貼壁

細胞形態： 梭形，多角(jiǎo)形

傳代(dài)比例(lì)： 1:2

傳代特性(xìng)： 可傳5代(dài)左(zuǒ)右(yòu)
；3代(dài)以(yǐ)內(nèi)狀態(tài)最佳(jiā)

消(xiāo)化液： 0.25%胰(yí)蛋白酶

大(dà)鼠骺軟骨(gǔ)細(xì)胞體外培養(yǎng)周(zhōu)期(qī)有限
；建議(yì)使(shǐ)用(yòng)配套的(dí)專用(yòng)生長培(péi)養基及正確的(dí)操(cāo)作(zuò)方法(fǎ)來培養，以(yǐ)此保證該(gāi)細胞的(dí)最佳(jiā)培(péi)養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介 實驗(yàn)室(shì)分離(lí)的(dí)大(dà)鼠(shǔ)骺(hóu)軟骨細(xì)胞采用膠原(yuán)酶-中(zhōng)性蛋(dàn)白(bái)酶聯合消化(huà)並軟骨細胞專用(yòng)培養(yǎng)基培(péi)養(yǎng)篩選(xuǎn)製(zhì)備(bèi)而來(lái)，細胞總(zǒng)量(liáng)約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶。

質量(liáng)檢測 實驗室(shì)分(fēn)離的大鼠骺(hóu)軟骨細(xì)胞(bāo)經Ⅱ型(xíng)膠原蛋(dàn)白(bái)免(miǎn)疫(yì)熒(yíng)光(guāng)鑒定，純度可達90%以上，且(qiě)不含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原體，細(xì)菌(jūn)，酵母(mǔ)和真菌(jūn)等(děng)。