大(dà)鼠(shǔ)呼吸(xī)道上皮細(xì)胞

大(dà)鼠呼吸(xī)道上皮細胞分離(lí)自呼吸(xī)道(dào)；呼吸道是肺呼吸(xī)時(shí)氣(qì)流(liú)所經(jīng)過的(dí)通(tōng)道，有肺(fèi)脊(jǐ)椎動(dòng)物(wù)的呼吸(xī)道(dào)分上(shàng)，下兩部鼻，咽和喉(hóu)合稱(chēng)上(shàng)呼吸(xī)道(dào)。氣(qì)管及其以後一分(fēn)再分(fēn)的(dí)管道(dào)，合稱(chēng)為(wéi)下呼(hū)吸道(dào)，或稱為氣(qì)管樹。氣管樹是隨著動(dòng)物(wù)的進(jìn)化(huà)逐漸復雜化(huà)的。整(zhěng)個(gè)呼吸(xī)道內表麵都(dū)分布有(yǒu)分泌(mì)液和纖(xiān)毛(máo)（鼻(bí)孔(kǒng)，咽後(hòu)壁和(hé)聲(shēng)帶(dài)黏(nián)膜(mó)除外），它(tā)能(néng)溫暖（或冷卻），濕潤(rùn)和淨化(huà)吸入(rù)的(dí)空氣，對(duì)於(yú)呼吸器(qì)官(guān)和機(jī)體有著保(bǎo)護作用。呼吸道(dào)以骨或軟骨做支架(jià)，其內(nèi)表(biǎo)麵(miàn)覆蓋著黏膜(mó)，黏(nián)膜內(nèi)分布著豐(fēng)富(fù)的毛(máo)細血管。呼(hū)吸道(dào)上皮細(xì)胞屬(shǔ)於(yú)假(jiǎ)復(fù)層纖(xiān)毛(máo)柱(zhù)狀上(shàng)皮(pí)，分布於(yú)呼(hū)吸道的(dí)內表麵，主(zhǔ)要由(yóu)柱(zhù)狀(zhuàng)，杯形(xíng)，梭形(xíng)和錐形等(děng)不(bù)同形狀細(xì)胞組(zǔ)成。看上去像(xiàng)復層上皮(pí)，但(dàn)實際上所有細胞(bāo)底部均(jūn)附(fù)於基(jī)膜(mó)上，屬(shǔ)單(dān)層(céng)上皮，故(gù)稱(chēng)假復層(céng)柱狀上皮(pí)，上皮表(biǎo)麵(miàn)有纖毛(máo)，杯狀細胞可(kě)分泌粘(nián)液，包裹著大量(liáng)細(xì)菌(jūn)，借助(zhù)纖毛不(bù)斷(duàn)擺動將(jiāng)其慢(màn)慢(màn)移動(dòng)至出(chū)消化(huà)道。

自(zì)備試(shì)劑： 0.25%胰蛋(dàn)白(bái)酶(méi)  ，鼠尾膠原(yuán)蛋(dàn)白Ⅰ型(xíng)（1×）或(huò)鼠尾膠(jiāo)原(yuán)蛋(dàn)白(bái)Ⅰ型(xíng)（1 mg/mL）  ，PBS  ，完全培養(yǎng)基

包被條件(jiàn)： 鼠尾(wěi)膠(jiāo)原(yuán)Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培養基(jī)： 大鼠(shǔ)呼吸道(dào)上皮(pí)細(xì)胞完(wán)全培養基(jī)(含FBS，生長(cháng)添加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液(yè)頻率： 每2-3天換(huàn)液一次

生(shēng)長特(tè)性(xìng)： 貼(tiē)壁(bì)

細(xì)胞形態(tài)： 上(shàng)皮(pí)細胞樣

傳(chuán)代(dài)比例(lì)： 1:2

傳代(dài)特性： 可(kě)傳1-2代(dài)

消化液： 0.25%胰蛋白酶

大(dà)鼠(shǔ)呼吸道上(shàng)皮(pí)細胞體(tǐ)外培養周(zhōu)期有限；建(jiàn)議(yì)使用(yòng)配套的專用生長培養(yǎng)基(jī)及正(zhèng)確的操作(zuò)方法(fǎ)來培(péi)養，以此保(bǎo)證該(gāi)細(xì)胞的最(zuì)佳培(péi)養狀態。

方法簡介 實(shí)驗(yàn)室(shì)分離的(dí)大(dà)鼠呼吸道上皮細(xì)胞采(cǎi)用(yòng)鏈黴蛋白酶-膠(jiāo)原酶(méi)混合(hé)消化(huà)法(fǎ)結合(hé)差速貼壁(bì)法，並(bìng)通(tōng)過(guò)上皮細胞(bāo)專用(yòng)培養基(jī)培(péi)養篩(shāi)選(xuǎn)製備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實驗室分離的大鼠呼(hū)吸(xī)道上(shàng)皮(pí)細胞經PCK免疫熒光(guāng)鑒(jiàn)定，純(chún)度可(kě)達90%以上(shàng)，且不含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原體，細菌(jūn)，酵(jiào)母和真(zhēn)菌(jūn)等。