大(dà)鼠(shǔ)脊髓(suǐ)成纖維細胞

大鼠脊(jǐ)髓(suǐ)成(chéng)纖維細(xì)胞分離自脊髓(suǐ)組織；脊髓是(shì)細細的管(guǎn)束(shù)狀的(dí)神(shén)經結構(gòu)，位於脊(jǐ)柱的椎管內且(qiě)被脊(jǐ)椎保(bǎo)護(hù)；是源自腦的中樞(shū)神經係統(tǒng)延(yán)伸部分(fēn)。中樞(shū)神經(jīng)係(xì)統(tǒng)的(dí)細胞(bāo)依靠復雜(zá)的聯係(xì)來處(chǔ)理傳(chuán)遞(dì)信息(xī)。脊髓(suǐ)的主(zhǔ)要功能(néng)是傳送腦(nǎo)與(yǔ)外周(zhōu)之(zhī)間(jiān)的神(shén)經(jīng)信(xìn)息。人和脊椎(zhuī)動(dòng)物中樞(shū)神(shén)經係(xì)統的一部(bù)分，在椎管(guǎn)裏(lǐ)麵，上端(duān)連(lián)接延髓(suǐ)，兩(liǎng)旁(páng)發出成(chéng)對的(dí)神(shén)經(jīng)，分布到四肢，體壁和內(nèi)髒(zàng)。脊(jǐ)髓(suǐ)的內(nèi)部有一個H形（蝴(hú)蝶(dié)型(xíng)）灰(huī)質(zhì)區(qū)，主(zhǔ)要(yào)由神經(jīng)細胞構成；在(zài)灰質(zhì)區(qū)周(zhōu)圍為(wéi)白質(zhì)區，主要(yào)由有髓(suǐ)神(shén)經纖維組(zǔ)成；脊髓是(shì)許(xǔ)多簡單(dān)反射的中樞。脊(jǐ)髓兩(liǎng)旁發(fā)出許多(duō)成(chéng)對(duì)的神經(jīng)（稱為(wéi)脊神經）分(fēn)布到全(quán)身皮(pí)膚(fū)，肌(jī)肉和內髒器官。脊髓(suǐ)是(shì)周圍(wéi)神經(jīng)與(yǔ)腦之間的(dí)通路，也是許多簡單反射活動的低(dī)級中樞(shū)。按(àn)脊神經的(dí)出(chū)入(rù)可把脊髓也分為相(xiāng)應(yīng)的(dí)31節，31對(duì)脊(jǐ)神(shén)經就是(shì)由不(bù)同的脊椎發(fā)出(chū)的。成纖維(wéi)細(xì)胞（Fibroblast）是疏鬆(sōng)結締組織的(dí)主要(yào)細胞成(chéng)分(fēn)，由(yóu)胚胎時(shí)期(qī)的間充質(zhì)細胞(bāo)分化而來；成纖(xiān)維細胞較大，輪廓清(qīng)楚，多(duō)為(wéi)突(tū)起(qǐ)的(dí)紡(fǎng)錘(chuí)形或(huò)星(xīng)形(xíng)的(dí)扁平狀(zhuàng)結(jié)構，其(qí)細胞(bāo)核呈規則的(dí)卵(luǎn)圓形，核(hé)仁大而明(míng)顯(xiǎn)。成纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)功能(néng)活(huó)動(dòng)旺盛(shèng)，細(xì)胞(bāo)質嗜(shì)弱鹼性，具明(míng)顯(xiǎn)的蛋(dàn)白(bái)質合成和分(fēn)泌活(huó)動(dòng)，在一(yī)定條件(jiàn)下，它可以實現(xiàn)跟(gēn)纖維細(xì)胞(bāo)的(dí)互相轉化；成纖維細(xì)胞對(duì)不(bù)同(tóng)程度(dù)的細(xì)胞變(biàn)性(xìng)，壞死(sǐ)和組織缺損(sǔn)的(dí)修(xiū)復有(yǒu)著(zhuó)十分(fēn)重要的作用。剛(gāng)分離的(dí)脊髓成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)呈圓(yuán)形，折光性良(liáng)好，懸浮(fú)於培(péi)養基中(zhōng)。30 min細胞貼(tiē)壁，其(qí)中(zhōng)部分開始伸出偽(wěi)足，表現(xiàn)為小的突起；6 h後(hòu)細(xì)胞基(jī)本貼壁(bì)完全，伸(shēn)展(zhǎn)成梭形(xíng)，胞核清(qīng)晰，分(fēn)布較均(jūn)匀(yún)，散(sàn)在生長(cháng)，不(bù)聚集成(chéng)團(tuán)；細胞(bāo)生(shēng)長(cháng)迅(xùn)速(sù)，5-7天即(jí)呈(chéng)融合狀(zhuàng)態(tài)，細(xì)胞(bāo)排(pái)列(liè)緊(jǐn)密，有的交叉(chā)重疊生(shēng)長，平坦(tǎn)，胞體較大(dà)，細胞質(zhì)透(tòu)明(míng)，細胞(bāo)核(hé)較大，呈橢圓形，顏(yán)色(sè)淡(dàn)。細胞融(róng)合，並(bìng)彼(bǐ)此連接成(chéng)網狀(zhuàng)；細胞(bāo)呈突(tū)起的紡錘形或星(xīng)形(xíng)的(dí)扁平分(fēn)布。脊髓成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)在生理條(tiáo)件下的(dí)主(zhǔ)要(yào)功能(néng)包(bāo)括構造(zào)和(hé)維持組(zǔ)織的正(zhèng)常(cháng)形(xíng)態；合(hé)成和(hé)釋(shì)放細(xì)胞外(wài)基(jī)質(zhì)；組織(zhī)損(sǔn)傷後(hòu)及時大(dà)量聚集修復(fù)損(sǔn)傷(shāng)組織。

自(zì)備(bèi)試劑(jì)
： 0.25%胰蛋(dàn)白(bái)酶  ，PBS  ，完全培養(yǎng)基

培養基(jī)
： 大鼠(shǔ)脊髓成纖(xiān)維細胞(bāo)完全培養(yǎng)基(含FBS，生長添加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液頻率(shuài)
： 每(měi)2-3天(tiān)換(huàn)液(yè)一次

生長特性(xìng)
： 貼壁(bì)

細胞形態(tài)
： 成(chéng)纖維細胞樣

傳(chuán)代(dài)比例(lì)
： 1:2

傳(chuán)代特(tè)性
： 可(kě)傳5代(dài)左右(yòu)；3代以內狀(zhuàng)態(tài)最(zuì)佳

消(xiāo)化液
： 0.25%胰蛋白(bái)酶(méi)

大鼠脊(jǐ)髓成纖(xiān)維細(xì)胞體外培養周(zhōu)期(qī)有限；建議(yì)使用(yòng)配(pèi)套(tào)的(dí)專用生長培(péi)養基(jī)及正確的(dí)操作方法來(lái)培(péi)養，以此保證(zhèng)該(gāi)細(xì)胞的最佳培(péi)養(yǎng)狀態。

方(fāng)法簡介 實驗室分(fēn)離的大鼠(shǔ)脊髓成纖維(wéi)細胞采用胰(yí)蛋(dàn)白酶-膠(jiāo)原酶(méi)混合酶消(xiāo)化後差(chà)速貼(tiē)壁製備而(ér)來，細(xì)胞總量約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室(shì)分(fēn)離(lí)的大鼠脊髓成(chéng)纖維(wéi)細胞(bāo)經(jīng)Vimentin免疫(yì)熒(yíng)光(guāng)鑒(jiàn)定，純度可(kě)達(dá)90%以上，且(qiě)不含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原體，細菌(jūn)，酵母和(hé)真菌(jūn)等。