大(dà)鼠(shǔ)脊(jǐ)髓神(shén)經幹細(xì)胞

大(dà)鼠脊(jǐ)髓神(shén)經幹(gān)細(xì)胞分離自(zì)脊(jǐ)髓(suǐ)組織；脊髓(suǐ)是細細的(dí)管束(shù)狀(zhuàng)的神經(jīng)結構，位(wèi)於脊柱的椎(zhuī)管(guǎn)內且(qiě)被(bèi)脊(jǐ)椎(zhuī)保護；是源自腦的中樞神(shén)經係統延伸部分(fēn)。中(zhōng)樞(shū)神經(jīng)係統的(dí)細(xì)胞(bāo)依靠(kào)復(fù)雜(zá)的聯係來(lái)處理(lǐ)傳(chuán)遞信息。脊(jǐ)髓(suǐ)的(dí)主要(yào)功(gōng)能是傳(chuán)送腦(nǎo)與外周之間的(dí)神經信(xìn)息(xī)。人(rén)和脊椎(zhuī)動物(wù)中(zhōng)樞(shū)神(shén)經(jīng)係(xì)統的一部分，在椎(zhuī)管裏(lǐ)麵，上(shàng)端連(lián)接延(yán)髓(suǐ)，兩旁(páng)發(fā)出成對(duì)的神經，分布到(dào)四(sì)肢(zhī)，體壁和內(nèi)髒。脊髓(suǐ)的(dí)內部(bù)有一(yī)個H形（蝴(hú)蝶型(xíng)）灰質區(qū)，主(zhǔ)要由神經(jīng)細胞構成(chéng)；在(zài)灰質(zhì)區周(zhōu)圍(wéi)為白(bái)質(zhì)區，主要(yào)由有(yǒu)髓神經纖維組成；脊髓(suǐ)是(shì)許多簡單反射的中(zhōng)樞。脊髓兩旁發出(chū)許(xǔ)多(duō)成(chéng)對的神(shén)經（稱(chēng)為(wéi)脊(jǐ)神(shén)經(jīng)）分布到(dào)全身(shēn)皮膚(fū)，肌(jī)肉(ròu)和內(nèi)髒器(qì)官。脊髓(suǐ)是周(zhōu)圍(wéi)神經與腦(nǎo)之間(jiān)的(dí)通路(lù)，也是許多(duō)簡(jiǎn)單反射(shè)活(huó)動(dòng)的低(dī)級中(zhōng)樞(shū)。按脊(jǐ)神(shén)經(jīng)的出入(rù)可(kě)把脊(jǐ)髓也分(fēn)為(wéi)相應的(dí)31節，31對(duì)脊(jǐ)神經(jīng)就(jiù)是(shì)由(yóu)不(bù)同(tóng)的脊(jǐ)椎發出的(dí)。神經(jīng)幹(gān)細胞(bāo)是一類具(jù)有分(fēn)裂潛能(néng)和自更新能力(lì)的(dí)母(mǔ)細胞(bāo)，它(tā)可(kě)以(yǐ)通過(guò)不(bù)對等的分裂方(fāng)式產生神經組(zǔ)織的各類(lèi)細胞。需(xū)要強(qiáng)調的是，在腦脊髓(suǐ)等(děng)所有神(shén)經組(zǔ)織中(zhōng)，不(bù)同的神(shén)經幹細胞(bāo)類型產生(shēng)的(dí)子(zǐ)代(dài)細(xì)胞種類不同(tóng)，分布也不同。神經幹(gān)細(xì)胞(bāo)作(zuò)為(wéi)幹(gān)細(xì)胞的(dí)一種(zhǒng)，它(tā)具有其它(tā)所有幹細胞(bāo)的基(jī)本特(tè)征具(jù)有自(zì)我(wǒ)維(wéi)持(chí)和(hé)自我更(gēng)新能力，具有多種分(fēn)化潛能(néng)，具有(yǒu)分化為(wéi)本(běn)係統大(dà)部分類型(xíng)細胞的能力，這(zhè)種自我更新和分(fēn)化(huà)潛能(néng)可(kě)以(yǐ)維(wéi)持(chí)相當長的時(shí)間甚至(zhì)終生(shēng)，對損傷(shāng)和(hé)疾病具(jù)有(yǒu)反應(yīng)能(néng)力。神經(jīng)幹細(xì)胞在(zài)疾病(bìng)，損傷(shāng)狀(zhuàng)態下(xià)具有(yǒu)增(zēng)殖，遷移，並向神(shén)經細胞，星形膠質細胞和少(shǎo)突膠質細(xì)胞(bāo)分化的(dí)能力，已成(chéng)為神經係統(tǒng)損(sǔn)傷(shāng)修復(fù)和(hé)再生研(yán)究(jiū)的熱點，體外建立穩(wěn)定的(dí)神經(jīng)幹(gān)細胞(bāo)培養模(mó)型(xíng)是其基礎和臨(lín)床應用(yòng)的前提。神經(jīng)幹細(xì)胞在(zài)培(péi)養(yǎng)3-4d後，可形成(chéng)神經(jīng)球，神經球在培(péi)養基中呈懸(xuán)浮(fú)生長(cháng)。

自備試劑(jì)： Accutase

消化液： Accutase消化液或0.25%胰蛋白(bái)酶

大(dà)鼠(shǔ)脊髓(suǐ)神經幹細胞(bāo)體外(wài)培養周(zhōu)期有限；建(jiàn)議使(shǐ)用配(pèi)套的(dí)專(zhuān)用生(shēng)長培(péi)養基(jī)及(jí)正確的操作方法來(lái)培(péi)養(yǎng)，以(yǐ)此保(bǎo)證該(gāi)細胞的最佳(jiā)培養狀(zhuàng)態(tài)。

方法(fǎ)簡介 實驗室(shì)分(fēn)離的大鼠(shǔ)脊髓神(shén)經(jīng)幹細胞(bāo)采用胰(yí)蛋白酶(méi)消(xiāo)化後(hòu)差速(sù)貼壁，結(jié)合(hé)神(shén)經幹細(xì)胞專(zhuān)用(yòng)培(péi)養(yǎng)基(jī)培(péi)養(yǎng)篩(shāi)選製備(bèi)而來(lái)，總(zǒng)量約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測 實驗室分離的大鼠脊髓(suǐ)神經(jīng)幹(gān)細(xì)胞(bāo)經Nestin免(miǎn)疫(yì)熒光(guāng)鑒定，純(chún)度可(kě)達(dá)90%以上(shàng)，且(qiě)不含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原體(tǐ)，細菌，酵(jiào)母(mǔ)和真菌等(děng)。