大(dà)鼠(shǔ)角(jiǎo)膜(mó)基(jī)質細胞

大(dà)鼠角膜基質(zhì)細胞(bāo)分離(lí)自眼(yǎn)角(jiǎo)膜組(zǔ)織；角(jiǎo)膜位(wèi)於(yú)眼球前(qián)壁(bì)的(dí)一層透(tòu)明膜，約(yuē)占(zhān)纖(xiān)維膜(mó)的(dí)前(qián)1/6，從後(hòu)麵看角(jiǎo)膜(mó)呈(chéng)正圓形，從前麵看為(wéi)橫橢圓(yuán)形(xíng)。角(jiǎo)膜厚(hòu)度(dù)各(gè)部分不盡(jìn)相(xiāng)同，中央部(bù)最(zuì)薄。角膜有十分(fēn)敏感的神經(jīng)末梢(shāo)，如有外(wài)物(wù)接(jiē)觸角(jiǎo)膜(mó)，眼瞼便(biàn)會(huì)不由自主(zhǔ)地合上以保護眼睛(jīng)。為了保(bǎo)持透明(míng)，角膜並沒有(yǒu)血管(guǎn)，透過(guò)外(wài)界空氣(qì)，淚(lèi)液(yè)及房水獲(huò)取養份(fèn)及(jí)氧氣。角膜分(fēn)為五(wǔ)層(céng)，由(yóu)前向(xiàng)後(hòu)依次(cì)為上皮細胞層，前彈(dàn)力(lì)層(céng)，基質(zhì)層(céng)，後(hòu)彈力(lì)層(céng)，內皮細胞層(céng)。角膜基(jī)質(zhì)層是(shì)角膜(mó)的主(zhǔ)要(yào)組成(chéng)部分，占(zhān)據(jù)角(jiǎo)膜厚(hòu)度的90%，由角(jiǎo)膜基(jī)質細胞，膠(jiāo)原(yuán)纖維和(hé)細(xì)胞外(wài)基(jī)質(zhì)構成(chéng)。角(jiǎo)膜基質層(céng)缺(quē)損的(dí)修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞(bāo)的增殖(zhí)及(jí)分(fēn)泌(mì)細(xì)胞外基質(zhì)完(wán)成(chéng)。角膜基(jī)質層(céng)具(jù)有結構規整，透明度高(gāo)的特點，正常情況下(xià)角(jiǎo)膜基(jī)質細(xì)胞分(fēn)泌組成基(jī)質(zhì)層(céng)的成(chéng)分(fēn)，維持(chí)角膜的(dí)透明(míng)度，此細胞對(duì)於(yú)角膜(mó)損(sǔn)傷的(dí)修(xiū)復(fù)具有重(zhòng)要(yào)意義(yì)。角(jiǎo)膜(mó)基(jī)質細胞，存在(zài)於(yú)角膜(mó)基(jī)質層(céng)中，在(zài)正常情況下，處於(yú)靜(jìng)止狀態。但(dàn)當角膜損傷時(shí)，不同(tóng)上(shàng)皮(pí)來源的因子(zǐ)及(jí)環境信號(hào)，將影響(xiǎng)角(jiǎo)膜基質細(xì)胞(bāo)的(dí)應(yīng)答反應，決(jué)定著(zhuó)角膜能否完全被(bèi)修(xiū)復(fù)。

自(zì)備(bèi)試劑： 0.25%胰(yí)蛋白酶  ，PBS  ，完(wán)全培(péi)養基

培養基： 大(dà)鼠角(jiǎo)膜(mó)基質(zhì)細胞完全(quán)培養基(jī)(含FBS，生(shēng)長(cháng)添(tiān)加劑，Penicillin，Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天(tiān)換液(yè)一(yī)次(cì)

生長(cháng)特(tè)性： 貼(tiē)壁(bì)

細胞(bāo)形(xíng)態： 梭形，多角形(xíng)

傳代比例： 1:2

傳代特(tè)性(xìng)： 可(kě)傳2-3代

消(xiāo)化液： 0.25%胰蛋(dàn)白酶

大鼠(shǔ)角膜基質細(xì)胞體外(wài)培(péi)養(yǎng)周期有限；建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用配(pèi)套的專用(yòng)生長(cháng)培(péi)養基(jī)及正確的操(cāo)作方法(fǎ)來(lái)培養，以此保(bǎo)證(zhèng)該(gāi)細胞的最佳培(péi)養(yǎng)狀態。

方(fāng)法簡介 實驗(yàn)室分(fēn)離的(dí)大(dà)鼠(shǔ)角(jiǎo)膜基質(zhì)細胞采(cǎi)用膠(jiāo)原酶(méi)消(xiāo)化後(hòu)組織(zhī)貼塊法製(zhì)備而來(lái)，細胞(bāo)總量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量(liáng)檢(jiǎn)測 實驗室分離的(dí)大鼠角(jiǎo)膜基(jī)質(zhì)細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度(dù)可達90%以上，且不含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細菌，酵母和(hé)真菌等(děng)。