人乳腺(xiàn)導管上皮細(xì)胞(bāo)

人(rén)乳腺導管(guǎn)上(shàng)皮(pí)細胞(bāo)分(fēn)離(lí)自人乳(rǔ)腺導管上皮組(zǔ)織(zhī)，是構(gòu)成乳腺(xiàn)導管的核心功能細胞(bāo)。核(hé)心(xīn)功(gōng)能為(wéi)合成和分(fēn)泌乳汁(zhī)成(chéng)分，參(cān)與乳(rǔ)腺(xiàn)的(dí)泌(mì)乳過程；同時具有(yǒu)增殖(zhí)分(fēn)化能力，受雌激(jī)素，孕激(jī)素調(tiáo)控(kòng)，參與(yǔ)乳腺(xiàn)的發(fā)育和周(zhōu)期性(xìng)變化(huà)。功(gōng)能(néng)異常與乳腺(xiàn)增生，乳(rǔ)腺(xiàn)導管擴張(zhāng)症，乳腺癌等(děng)乳(rǔ)腺疾病密切相關。原代培養3-4天後開(kāi)始(shǐ)貼(tiē)壁(bì)，初始形態呈(chéng)多邊(biān)形或柱狀(zhuàng)；培(péi)養1周左右逐(zhú)漸(jiàn)匯合(hé)，形(xíng)成(chéng)單(dān)層緊(jǐn)密(mì)排列的上(shàng)皮樣細胞層；傳代後細胞生長(cháng)平(píng)穩，可(kě)穩定(dìng)維持乳(rǔ)腺導(dǎo)管上(shàng)皮細胞的(dí)典型(xíng)形態(tài)及分(fēn)泌功能(néng)。是研究(jiū)乳(rǔ)腺生理功能，乳(rǔ)腺(xiàn)疾(jí)病發病(bìng)機(jī)製(zhì)及相(xiāng)關藥(yào)物篩(shāi)選的理想(xiǎng)實驗材(cái)料(liào)。

自備試劑(jì)：0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶-EDTA消(xiāo)化(huà)液，PBS緩衝(chōng)液(yè)，完全(quán)培(péi)養(yǎng)基
培(péi)養(yǎng)基：人乳腺(xiàn)導管(guǎn)上皮細(xì)胞完全(quán)培(péi)養(yǎng)基(jī)（含FBS，表(biǎo)皮(pí)生(shēng)長因(yīn)子，牛垂體提取物(wù)，雌激(jī)素(sù)，孕激(jī)素(sù)，Penicillin，Streptomycin等）
換液(yè)頻率：每2-3天換液一次
生(shēng)長特(tè)性：貼壁(bì)生長
細胞形態：多(duō)邊形，柱狀(zhuàng)，匯合(hé)後呈單層(céng)緊密排(pái)列(liè)
傳代(dài)比例：1:2
傳代特(tè)性：可傳(chuán)4-6代；2-4代以內(nèi)細胞(bāo)狀(zhuàng)態(tài)最(zuì)佳(jiā)，功(gōng)能最(zuì)穩定
消(xiāo)化(huà)液：0.25%胰蛋白酶-EDTA消(xiāo)化液(yè)

人(rén)乳(rǔ)腺(xiàn)導管(guǎn)上皮(pí)細胞體(tǐ)外(wài)培(péi)養(yǎng)周期有限；建議使用配(pèi)套的(dí)專(zhuān)用(yòng)生(shēng)長培(péi)養基及(jí)正(zhèng)確(què)的操(cāo)作(zuò)方法(fǎ)來(lái)培(péi)養，以(yǐ)此(cǐ)保證該(gāi)細胞的最(zuì)佳培(péi)養狀(zhuàng)態(tài)。

方(fāng)法簡(jiǎn)介(jiè)：實驗室(shì)采用胰蛋(dàn)白(bái)酶-EDTA聯(lián)合消化(huà)法結(jié)合差速貼(tiē)壁(bì)法(fǎ)製(zhì)備該(gāi)細(xì)胞，細胞總量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質量(liáng)檢測(cè)：經(jīng)上皮(pí)細胞特異(yì)性標誌物(wù)（CK7，CK18，CK19，ZO-1）免(miǎn)疫(yì)熒(yíng)光(guāng)鑒(jiàn)定(dìng)，本細胞純度可達90%以(yǐ)上；經(jīng)乳汁(zhī)成分分泌檢測驗(yàn)證細胞功能正(zhèng)常(cháng)；經(jīng)檢(jiǎn)測不(bù)含有HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原體(tǐ)，細(xì)菌，酵母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌(jūn)等(děng)外源汙染物，細(xì)胞活性達標。