抗人(rén)EIFIAY單抗雜交瘤細胞(bāo)；B4B5C5具(jù)體(tǐ)配液(yè)方(fāng)法(fǎ)：
*步，配(pèi)製1L培(péi)養液(yè)。培養基中含有酚紅(hóng)指示(shì)劑，偏鹼時液(yè)體為深紅(hóng)或紫色，偏(piān)酸時則呈(chéng)黃(huáng)色(sè)。取(qǔ)配1L培養(yǎng)液的粉劑培(péi)養基(jī)，加入(rù)750ml三蒸水或去離(lí)子水，搖匀(一(yī)般(bān)培養(yǎng)液呈橘紅(hóng)色)；再(zài)加(jiā)入(rù)碳酸氫(qīng)鈉1～1．1g，至完全溶解(呈深紅(hóng)色(sè))；zui後(hòu)再加(jiā)三蒸水(shuǐ)或(huò)去離(lí)子(zǐ)水至1L止。
第(dì)二步(bù)，插吸管於(yú)配(pèi)好(hǎo)的培養(yǎng)液內(nèi)，通入(rù)二氧(yǎng)化碳氣體(tǐ)。隨(suí)著(zhuó)二(èr)氧化(huà)碳(tàn)氣(qì)的融(róng)人(rén)，液體逐漸變(biàn)成黃色(sè)。用一(yī)次性0．22 m孔徑的濾(lǜ)膜於正(zhèng)壓(yā)情況下(xià)將(jiāng)該(gāi)液體(tǐ)過(guò)濾除(chú)菌。在此過(guò)程中，由(yóu)於部分二氧(yǎng)化(huà)碳(tàn)氣體(tǐ)溢(yì)出(chū)，液體(tǐ)漸成(chéng)橘黃(huáng)色。此時迅速(sù)將其(qí)分(fēn)裝到(dào)4個(gè)250ml的(dí)瓶(píng)內，一(yī)定(dìng)塞嚴或擰緊(jǐn)瓶(píng)。在無菌情況(kuàng)下取樣(yàng)本(běn)數毫(háo)升，37。c無菌培(péi)養72h，確(què)定(dìng)該批(pī)細(xì)胞培(péi)養液無(wú)汙染後(hòu)方(fāng)可(kě)使用(yòng)。常(cháng)使用的培(péi)養液(yè)存放(fàng)於4℃冰箱(xiāng)內(nèi)，其(qí)它暫時不(bù)用的可放入一(yī)20。c冰箱內(nèi)保(bǎo)存。

第(dì)三(sān)步，根據(jù)不同細胞係的需求(qiú)添加不同量(liáng)血清和(hé)抗生(shēng)素。將配好的培(péi)養液吸(xī)入(rù)小培養瓶內，再將(jiāng)適量細胞吸(xī)入(rù)，塞(sāi)嚴(yán)或擰緊瓶蓋(gài)，置(zhì)37。c普通隔水式恒溫箱(xiāng)內(nèi)即(jí)可(kě)。操(cāo)作過程(chéng)中因有(yǒu)少量(liáng)二氧(yǎng)化碳氣體(tǐ)溢(yì)出，液體呈(chéng)橘紅(hóng)色，酸(suān)鹼(jiǎn)度(dù)(pH) 約(yuē)為(wéi)7．0～7．2。如果細(xì)胞較少或(huò)者生(shēng)長較慢。液(yè)體的pH值似宜(yí)偏酸(suān)些為(wéi)好。

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