技術(shù)文(wén)獻
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技術文(wén)獻
摩氏(shì)摩根(gēn)菌PCR檢測試(shì)劑盒(hé)反(fǎn)應(yīng)特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
(1) 特(tè)異性強
PCR反應(yīng)的特異(yì)性決定(dìng)因素為：
①引物(wù)與模板DNA特(tè)異正(zhèng)確(què)的結(jié)合(hé)；
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性。
其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合成反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結(jié)合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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