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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
|
平(píng)尾毛細綫(xiàn)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Capillaria caudinflataPCR |
YS-P013988 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑樣本建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
平(píng)尾毛細綫蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般用電泳分析，不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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