產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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衣原體通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Chlamydia spp.PCR |
YS-P014008 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議復核一次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
衣原體(tǐ)通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與模板的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性高的靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用同位素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模板。可直(zhí)接用臨床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
