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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
柯(kē)薩(sà)奇病(bìng)毒型(xíng)變種(zhǒng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
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2024-3-14 瀏覽次數(shù)：748
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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柯薩奇病毒型變種PCR檢測試(shì)劑盒 |
Coxsackie Virus(CA24v)A24RTPCR |
YS-P014065 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能會導致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保守性。
柯(kē)薩奇(qí)病(bìng)毒(dú)型變種PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引物與模板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以在較高的(dí)溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能保持很高(gāo)的正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性-退火-延(yán)伸反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要求低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
