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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
馬克洛菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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馬(mǎ)克(kè)洛(luò)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Crossiella equiPCR |
YS-P014068 |
分類(lèi):PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效期:一(yī)年(nián)
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年,這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下(xià),產物檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次(cì)實驗中同時(shí)滿足(zú),否則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑:有明(míng)顯的指數擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可疑樣本建議復(fù)核一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期(qī),則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性;
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染,試(shì)劑(jì)汙染,樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效能下降,可能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
馬克(kè)洛(luò)菌(jūn)PCR檢測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結合是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行(háng),結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能保持很(hěn)高的正確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因區(qū),其(qí)特異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞;在(zài)病毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一(yī)般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電泳分析,不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無(wú)放射性汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如(rú)血液(yè),體腔液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
