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PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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克羅諾(nuò)杆(gān)菌(jūn)通用(yòng)PCR檢測試劑盒(hé) |
Cronobacter spp.PCR |
YS-P014067 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一般為1年，這是指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保守性。
克羅諾杆(gān)菌通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的特異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術概論。
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