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PCR檢測試劑盒
商品屬性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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葡(pú)萄(táo)狀穗黴屬(shǔ)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Stachybotrys spp.PCR |
YS-P014763 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍融。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運輸，保存不當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
葡萄(táo)狀穗黴屬(shǔ)通用(yòng)PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性大大增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因區，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需要分離病毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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