產(chǎn)品中心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
|
聖(shèng)路易斯(sī)腦炎(yán)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
St.Louis Encephalitis Virus(SLEV)RTPCR |
YS-P014762 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次(cì)實驗中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與保守性(xìng)。
聖(shèng)路(lù)易斯腦(nǎo)炎病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物與模板的正確結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也就能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病毒或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
- 上(shàng)一條：葡萄狀(zhuàng)穗(suì)黴(méi)屬通用PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
- 下(xià)一條(tiáo)：鯉春病毒(dú)血症病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
