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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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牛(niú)肺(fèi)綫蟲PCR檢測試(shì)劑盒 |
Dictyocaulus viviparusPCR |
YS-P014099 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本建議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙染，樣品交叉(chā)汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
牛(niú)肺綫蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合的特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其特異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增產物一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要求低
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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