產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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犬惡(è)絲(sī)蟲PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Dirofilaria immitisPCR |
YS-P014100 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次，若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
犬惡絲(sī)蟲PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結合(復性)可以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需要分離病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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