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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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同(tóng)馬(mǎ)動(dòng)脈炎病(bìng)毒(dú)馬(mǎ)病(bìng)毒性動脈炎(yán)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Equine Viral Arteritis Virus（）RTPCR |
YS-P014172 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明顯的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引起的試劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
同馬動脈炎病(bìng)毒馬病(bìng)毒(dú)性動(dòng)脈炎病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正確結合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的(dí)特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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