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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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貓杯(bēi)狀(zhuàng)病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Feline Calicivirus(FCV)RTPCR |
YS-P014190 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部分試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確(què)引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性。
貓杯狀(zhuàng)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要(yào)用同位素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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