產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
地(dì)黴(méi)屬(shǔ)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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地(dì)黴(méi)屬通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Geotrichum spp.PCR |
YS-P014229 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件:-20℃避光保存(cún),避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián),這是指在適當的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產物檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足,否(fǒu)則該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本;對於可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次,若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴增期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染(rǎn),試劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸,保存不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效(xiào)能下降(jiàng),可能(néng)會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng);
④靶基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
地黴屬通(tōng)用(yòng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結合是關鍵。引物(wù)與模板的結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較高的溫度(dù)下進(jìn)行(háng),結合的(dí)特異(yì)性大(dà)大(dà)增加,被擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī),不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù),無(wú)放射性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需要分離病(bìng)毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技(jì)術概(gài)論。
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