產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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柏(bǎi)氏血(xiě)矛(máo)綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Haemonchus placeiPCR |
YS-P014249 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫,避(bì)光。
有效期(qī):一年(nián)
貨期(qī):現貨PCR試劑盒(hé)的有效期一般(bān)為(wéi)1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過正常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫的最高點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有明顯的指數擴增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
2.可疑:有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本(běn);對(duì)於可疑(yí)樣本建議復核一次(cì),若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸,保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確引起的(dí)試(shì)劑檢測效能下降,可(kě)能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶基因的特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
柏氏血(xiě)矛綫蟲PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性,使反應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加,被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很高的正確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性高的靶基因(yīn)區,其特異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以指數方(fāng)式增加的,能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增產物(wù)一般用電泳分(fēn)析,不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液,體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技(jì)術概論。
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