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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒

單純皰疹(zhěn)病毒通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)

文(wén)字:[大(dà)][中][小] 2024-3-14    瀏覽次數:658    
商(shāng)品屬性
產(chǎn)品名(míng)稱 英文名稱(chēng) 貨(huò)號(hào)
單(dān)純皰疹病(bìng)毒(dú)通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
Herpes Simplex Virus(HSV)PCR
YS-P014283
規(guī)格:50T
分(fēn)類(lèi):PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保(bǎo)存,避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光(guāng)。
有(yǒu)效期:一(yī)年

貨(huò)期(qī):現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。

【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 基綫(Baseline)設(shè)定:應選擇(zé)該次實(shí)驗指數(shù)擴增(zēng)前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的(dí)一(yī)段區(qū)域(yù)(所(suǒ)有樣(yàng)本熒光信號無較大波動(dòng)),起始點(Start)應避開熒(yíng)光采集起始(shǐ)階(jiē)段(duàn)的信(xìn)號(hào)波動,終止點(End)應(yīng)比(bǐ)最早(zǎo)出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的(dí)樣(yàng)本Ct值減少1~3個循環(huán),建議(yì)基(jī)綫設為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
1.   陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果應為(wéi)陰性(xìng),無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無Ct;
2.   陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽性,有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī),Ct值(zhí)應小於等於(yú)35;
3.   以上要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足,否(fǒu)則該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
1.   陽性(xìng):有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且Ct<38;
2.可(kě)疑:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本;對於(yú)可疑樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期,則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判定為(wéi)陰性;
3.   陰(yīn)性(xìng):無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1.   實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出現假陽性(xìng)結(jié)果;

2.   試劑運輸,保存不當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能下降,可(kě)能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。

PCR反(fǎn)應的特異性:
   ①引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)DNA特(tè)異(yì)正(zhèng)確(què)的結合(hé);
   ②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則;
   ③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng);
   ④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
單純(chún)皰(pào)疹病毒(dú)通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的溫度下進(jìn)行,結合的特(tè)異性大大(dà)增加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區,其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí),能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞;在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加好後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽液(yè),毛發(fā),細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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