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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商品屬性
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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火雞皰疹病毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Herpesvirus of Turkey (HVT) PCR |
YS-P014284 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有效期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次，若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致出現假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
火雞皰(pào)疹病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下進行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳分析，不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
