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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
鬆鼠(shǔ)猴(hóu)皰(pào)疹(zhěn)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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鬆鼠(shǔ)猴皰疹(zhěn)病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Herpesvirus Saimiri(HVS)PCR |
YS-P014285 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測試劑(jì)盒
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光保存,避免(miǎn)反復凍融。
運輸:低(dī)溫,避(bì)光(guāng)。
有效期:一年
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將閾值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一次(cì)實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú),否則該次實驗(yàn)視為無效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次(cì),若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性,否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸,保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降(jiàng),可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性;
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
鬆鼠(shǔ)猴(hóu)皰疹(zhěn)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行,結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加(jiā),被擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選擇特異性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區,其特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位);在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加好後(hòu),即在DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應,一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析,不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無放射性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液,體腔液,洗嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技術概(gài)論(lùn)。
