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PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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前(qián)病毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
HIV2 Provirus HIV2PCR |
YS-P014297 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為1年(nián)，這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
前(qián)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板的正確結合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶細胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
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