產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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嵴(jǐ)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
KobuvirusRTPCR |
YS-P014353 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
嵴病毒(dú)PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特異性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守性高(gāo)的靶基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指數方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增模板。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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