產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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錦(jǐn)鯉皰(pào)疹(zhěn)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Koi Herpesvirus(KHV)PCR |
YS-P014354 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn):-20℃避光保存,避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸:低溫,避(bì)光。
有效期:一年
貨期:現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一般為(wéi)1年(nián),這是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該次(cì)實驗視為無效。
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於可疑樣本建議復(fù)核(hé)一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定為陰性;
3. 陰性:無指數擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降,可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
錦鯉皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進行,結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大增加,被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能保持很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指數方式增加(jiā)的(dí),能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞;在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu),即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產物一般(bān)用電泳分析,不(bù)一定要用同位素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用(yòng)臨(lín)床標本如血液,體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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