產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
|
軍(jūn)團菌屬通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Legionella spp. PCR |
YS-P014363 |
分類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫,避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期:一年(nián)
貨期:現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年(nián),這是(shì)指在適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好超過正常(cháng)陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應(yīng)為陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī),Ct值應小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú),否則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期,則判定為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙染,樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑運輸,保存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測效(xiào)能下降,可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性與保守性。
軍團(tuán)菌屬通(tōng)用(yòng)PCR檢測(cè)試劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸是遵循鹼基配對原(yuán)則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進行,結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大增加,被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區,其特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞;在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定(dìng)要用同位素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發,細胞,活PCR技術(shù)概論(lùn)。
- 上一條(tiáo):巴西利(lì)什曼蟲
- 下(xià)一條:勞(láo)森菌(jūn)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
