產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
|
梅恩(ēn)君病(bìng)毒PCR檢測試劑盒 |
Main Drain Virus（MDV）RTPCR |
YS-P014396 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期一般(bān)為1年，這是(shì)指在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明顯的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑樣本建議(yì)復核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性(xìng)。
梅(méi)恩君病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與引物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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