產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
|
馬鼻疽杆菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Malleomyces malleiPCR |
YS-P014397 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般為1年，這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一(yī)次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或試劑(jì)配製不(bù)準確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降，可能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守性。
馬(mǎ)鼻(bí)疽(jū)杆菌PCR檢測試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物與模板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的(dí)正確度。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不一定(dìng)要用同位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
