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PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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發酵支(zhī)原體PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Mycoplasma fermentansPCR |
YS-P014476 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保守(shǒu)性。
發酵支原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與引物的(dí)結合(復(fù)性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特異性大大增加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特(tè)異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定要用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
