產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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馬內菲(fēi)青黴PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Penicillium marneffeiPCR |
YS-P014575 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次實驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議復核一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不當或試(shì)劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
馬內(nèi)菲青黴PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度下進行，結合的特異性大大(dà)增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特(tè)異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
