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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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美人魚(yú)發光杆菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé) |
Photobacterium damselaePCR |
YS-P014587 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次實驗視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現假陽性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製不準確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
美人魚發光杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與模(mó)板的正確結合是關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行，結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性高的靶基因區(qū)，其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
