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PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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小雙節病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Picobirnavirus(PBV)RNARTPCR |
YS-P014589 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
小雙(shuāng)節病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性和保守性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
